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目前试了lipofectmine2000,磷酸钙,还有翌圣的脂质体转染试剂,转染RAW264.7和BMDM效率都很低。我一般在转染前24小时铺板,6孔板铺30万或50万/孔,转染试剂用量都按照说明书,哪位比较有经验可以分享一下实验方法,谢谢!
sswei
操作方法如下:
1、BMDM巨噬细胞置于 6 孔板中;
2、密度为 2.5 × 105细胞;
3、细胞转染密度为 70%;
4、10 µL siRNA (100 pmol/mL) 和10ul转染试剂室温混合恒温 15 分钟;
5、然后加入含有 1ml 的正常 DMEM培养基到 6 孔板;
6、24 小时后换成新鲜 DMEM培养基继续培养;
dxyc42u
这个细胞就是比较难转染,需要多摸索条件,实在不行用病毒吧
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