ALP标记抗体方法步骤？

流程：过碘酸钠氧化-乙二醇终止-加入抗体-碳酸盐透析-硼氢化钠还原-硫酸铵沉淀-溶解透析。

碘酸钠法和双功能标记法都是常用的ALP标记抗体方法，以下是它们的具体步骤：

碘酸钠法：

用PBS等缓冲液洗涤细胞样品，使其附着于载玻片上。

用PBS等缓冲液固定细胞样品，使其不发生变形。

加入酸性碳酸钠缓冲液，将细胞中的内源性酶灭活，然后洗涤细胞样品。

加入一定浓度的碘酸钠，将其与细胞表面的ALP结合。

洗涤细胞样品，去除未结合的碘酸钠。

加入亚甲基蓝或BCIP/NBT染色剂，ALP结合的碘酸钠在染色剂的作用下产生颜色。

加入1%甲醛或PBS等缓冲液停止反应，然后洗涤细胞样品。

将载玻片反面涂上封片胶，覆盖在细胞样品上，然后放置于显微镜下观察和拍照。

双功能标记法：

用PBS等缓冲液洗涤细胞样品，使其附着于载玻片上。

用PBS等缓冲液固定细胞样品，使其不发生变形。

加入含有ALP标记物的二抗，使其与目标抗体结合。

加入含有荧光素底物的二抗，使其与ALP结合并发生荧光素化反应。

洗涤细胞样品，去除未结合的标记物和底物。

用甲醛或PBS等缓冲液停止反应，然后洗涤细胞样品。

将载玻片反面涂上封片胶，覆盖在细胞样品上，然后放置于荧光显微镜下观察和拍照。