化学发光免疫分析实验

免疫学实验

别名：

hemiluminescence immune assay，CLIA

最新修订时间：2022-02-10

简介

化学发光（chemiluminescence，CL）是指伴随化学反应过程所产生的光辐射现象，大多数化学发光是以 O2 和 H2O2 作为氧化剂的氧化反应发光。化学发光反应包括两个关键步骤，即化学激发和发光，化学激发需提供足够的化学能，激发化学发光剂在吸收能量后跃迁至电子激发态，而当返回较低能级基态时有足够的发光量子产率。目前，用于化学发光免疫分析实验的方法主要有 3 种：化学发光酶免疫分析、化学发光标记免疫分析和电化学发光免疫分析。

原理

化学发光免疫分析实验的基本原理是将酶或化学发光物质标记抗原或抗体，免疫反应后通过加入酶促反应的发光底物（前者）或发光启动剂如碱性 H2O2 溶液（后者）发生化学发光反应，化学发光检测仪通过光电倍增管（PMT）分析接受光量子产量，以光信号强度显示抗原-抗体反应结果。具有灵敏度高、线性范围宽、仪器简单和易于自动化等优点。

来源：丁香实验团队

操作方法

化学发光酶免疫分析

CLEIA 是基于酶联免疫分析方法基础上的检测方法，操作步骤与 ELISA 相同，竞争法测定小分子抗原物质，双抗体夹心法测定大分子抗原物质，以及间接法检测抗体等。CLEIA 不同于 ELISA 之处，在于酶的催化底物是化学发光剂，产生化学发光，产生的光信号强度通过化学发光信号检测仪来检测，由光量子阅读系统接收，光电倍增管将光信号转变为电信号并加以放大，较分光光度法检测灵敏度更高，线性范围更宽。酶促