化学发光酶免疫分析

CLEIA 是基于酶联免疫分析方法基础上的检测方法，操作步骤与 ELISA 相同，竞争法测定小分子抗原物质，双抗体夹心法测定大分子抗原物质，以及间接法检测抗体等。CLEIA 不同于 ELISA 之处，在于酶的催化底物是化学发光剂，产生化学发光，产生的光信号强度通过化学发光信号检测仪来检测，由光量子阅读系统接收，光电倍增管将光信号转变为电信号并加以放大，较分光光度法检测灵敏度更高，线性范围更宽。酶促催化底物发光，受温度、时间等因素影响，但发出的辉光，对测量的要求不高，既可用于全自动 CLIA 系统（封闭型）对临床高通量样品检测，也适合单样本测定，用于科学研究。

化学发光酶免疫分析的基本原理是基于酶联免疫分析方法基础上的检测方法，操作步骤与 ELISA 相同，竞争法测定小分子抗原物质，双抗体夹心法测定大分子抗原物质，以及间接法检测抗体等。CLEIA 不同于 ELISA 之处，在于酶的催化底物是化学发光剂，产生化学发光，产生的光信号强度通过化学发光信号检测仪来检测，由光量子阅读系统接收，光电倍增管将光信号转变为电信号并加以放大，较分光光度法检测灵敏度更高，线性范围更宽。

化学发光酶免疫分析可用于全自动 CLIA 系统（封闭型）对临床高通量样品检测，也适合单样本测定，用于科学研究。

器材：

① 微板型化学发光分析仪（MPL1 MicroplateLuminometer)

② 鼠抗人 TSHa 亚基单克隆抗体预包被板 (luminescence-grade)

A. 准备

自 2～8 ℃ 冰箱取出试剂以及抗体预包被板条。

B. 加样

样品和标准品分别定位于相应孔，每孔加样 50 μl，再于各孔加 HRP-TSHs mAb 100 μl，充分混匀，室温孵育 60 分钟。

C. 洗板

倾倒板孔中的反应液，各孔加入洗液约 300 μl，静置 20 秒左右，除去其中液体，将板中液体拍尽，如此洗 4 次。

D. 加发光底物液

使用前取等量化学发光底物 A 液和 B 液，混匀后每孔加 100 μl。

E. 测定 RLU

在加发光底物液后的第 5～20 分钟测定各孔的发光强度（RLU）。

F. 实验结果及分析