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我想用DNMT1抑制剂DAC处理细胞观察细胞甲基化变化以及下游基因表达变化,大概用什么浓度合适?

相关实验:DNA 甲基化分析

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HJ0808

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2 个回答

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土井挞克树

有帮助

一般0.1-0.5mmol/l的浓度处理就够了

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loveliufudan

有帮助

细胞对DAC的敏感度与细胞类型、实验条件和实验目的等因素有关,因此需要进行优化实验。

在实验中,建议采用DAC的剂量梯度来评估细胞的敏感性和最适合的剂量。通常,DAC的最大有效剂量(MED)是参考文献、先前实验和相关文献中报告的。对于DAC的最大有效剂量,最好是选择低于细胞毒性和细胞凋亡的剂量。一般建议DAC的最大有效浓度为5μM到10μM。然而,不同类型的细胞在对DAC的反应性上可能存在差异。

在进行DAC处理时,需要选择适当的处理时间。建议处理时间为24-72小时,这通常取决于实验目的、细胞类型和实验条件等因素。在实验过程中,需要监测细胞的生长情况、形态、凋亡情况和甲基化状态等,并与未处理的对照组进行比较。

最后,在检测DAC处理对细胞DNA甲基化状态和下游基因表达的影响时,可以使用多种技术,如甲基化敏感的限制性内切酶(MSRE)PCR、甲基化特异性PCR、甲基化芯片等技术进行分析。需要根据实验的具体情况选择合适的技术进行分析。

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