大草原的小灰驴
细胞涂片标本,比如甲状腺穿刺细胞涂片、胸腹水离心沉淀物等标本类型,如果做免疫组化染色需要注意哪些步骤和处理?其方法与石蜡切片的免疫组化染色有哪些不同的地方呢?
土井挞克树
免疫组化染色是用一抗与被检测组织中目的蛋白抗原结合,然后HRP等标记的二抗与一抗进行结合,最后通过DAB显色反应,进而确认所要检测蛋白抗原的定位、半定量等目的而石蜡切片是用he染色,不存在抗体结合,效果差
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一、切片必须完整、均匀、平整、无褶皱;
二、组织脱水必须彻底干净;
三、达到免疫组织化学技术的要求,组织固定越新鲜越好;
四、切片脱蜡必须干净,否则将会影响免疫组化染色的最后结果;
五、切片的附贴必须牢固,既要经得起抗原修复时高温的作用而不使轻易脱片,又不至于破坏抗原。
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对于细胞涂片标本的免疫组化染色,需要注意以下几个步骤和处理:
标本的制备:细胞涂片标本制备需要注意涂片均匀性,同时也需要保证细胞完整性和保存良好,避免细胞损伤或者破坏。另外,对于一些含有黏液或血凝块等标本,需要事先进行清洗和处理,避免染色干扰。
抗原修复:细胞涂片标本染色前需要进行抗原修复,通常采用高压蒸煮法或酶解法等方法。
防止细胞脱落:细胞涂片染色过程中,由于细胞与玻璃片的黏附力较小,易出现细胞脱落的现象,因此需要特别注意染色时的液体流速和液面高度,避免细胞脱落。
相比于石蜡切片免疫组化染色,细胞涂片标本免疫组化染色有以下不同之处:
抗原修复方法不同:细胞涂片标本染色需要进行高压蒸煮或者酶解等抗原修复方法,而石蜡切片则通常采用热解脱方法。
防止细胞脱落:由于细胞涂片标本易出现细胞脱落的问题,因此在染色时需要特别注意细胞的黏附性和液面高度,避免细胞脱落。
检测方法不同:细胞涂片标本染色通常采用荧光染色或者酶标记二抗等方法,而石蜡切片则通常采用酶标记一抗和染色剂着色等方法。
存储方式不同:细胞涂片标本染色后需要在显微镜下进行观察和拍照,存储时通常需要避免湿度和光照,而石蜡切片染色后则可以直接在玻片上保存,存储时也较为方便。