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想要检测T淋巴细胞亚群如cd4、cd8、th17、treg的数量和比例,是不是一定得用流式?其他检测手段可以吗?比如elisa?

相关实验:采用流式细胞术评估淋巴细胞介导的细胞毒作用

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dxy_sshlroo5

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3 个回答

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土井挞克树

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Elisa不好,比例得不到,除了流式你可以跑免疫荧光,通过荧光表达来推算比例。

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huarenqiang5

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检测T淋巴细胞亚群如cd4、cd8、th17、treg的数量和比例的检测方法有以下几种:

一、体液中T细胞亚群的检测方法

体液需要Ficoll-Hypaqu分离富含淋巴细胞的单个核细胞(MNC),然后根据条件选择适宜的免疫学方法检测。

1、酶免疫染色技术:

2、流式细胞仪:

3、免疫荧光染色法:

4、补体杀伤试验:

5、花环形成试验:

常用的有红细胞花环和细菌花环,通过抗T细胞McAb与T细胞表面抗原结合形成可观察的花环。

直接红细胞花环试验:经醛化的红细胞与T细胞McAb连接成指示剂。当淋巴细胞周围结合4个以上红细胞者为阳性细胞。

间接红细胞花环试验:以结合了抗鼠IgG的醛化红细胞为指示细胞,淋巴细胞借T细胞McAb同指示细胞结合形成花环,光镜计数,结合3个以上红细胞者为阳性细胞。

SPA菌花环试验:以葡萄球菌为指示剂。SPA同抗T细胞McAb或抗鼠IgG结合,然后直接或者间接与淋巴细胞形成花环,染色后油镜下观察。凡周围连接10个以上葡萄球菌的淋巴细胞为阳性细胞。

二、组织中T细胞亚群的检测

常用的方法有酶免疫组织化学方法和免疫荧光技术。如需对T细胞进行定位,可选择分离的淋巴细胞进行分析。

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Dr_劉医生

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是的,基本用流式来分选细胞亚群。elisa可行性不高,一个细胞亚群都得做一次样品,

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