fluo—3am或fitc 单通道 流式分析方法求助！！

进行流式细胞仪检测，Annexin V-FITC为绿色荧光，PI为红色荧光。

注意：FITC为绿色荧光，此检测方法不适用于已带绿色荧光标签的细胞

结果示例及分析

四个象限的意义

左上/P2-Q1：坏死细胞；

右上/P2-Q2：晚期凋亡细胞；

右下/P2-Q3：早期凋亡；

左下/P2-Q4：未发生凋亡的细胞。

细胞凋亡率：P2-Q2与P2-Q3象限百分率的和。

采集数据时用双指数直方图，x 轴为时间，y 轴为 Fluo3（线性）。

首先收集样品大约 1 分钟，此时可以调节 FL1 电压使 Fluo3 基线信号在 50 左右或者以下。

然后软件上不中止样品的收集，但是迅速把样品管取出，往管中加 入 ionomycin，混匀，然后放入采集处继续采集数据大约 5 分钟。此时应看到信号很快大幅度上升。

注意，为了去除流式仪器中残存的 ionomycin 或其他刺激物（以免引起下一个样品的误差），样品间最好用漂白水洗一下机子。