离子细胞化学实验　

免疫学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

离子细胞化学可用来显示细胞内离子定位分布，目前用得比较多的是显示细胞内钙的分布，通常需结合EDX能谱分析。

细胞内钙离子分布是高度隔室化的，形成钙离子浓度不同的钙池，正常情况下，细胞内胞浆、线粒体、核等部位都有钙的分布；在大多病理情况下（如缺血、缺氧、中毒等），细胞内钙可升高，并且进入到细胞内的钙很多进入到线粒体内。细胞内钙离子细胞化学的原理是：首先用磷酸盐或草酸盐与钙离子反应，在原位形成沉淀，然后再用焦锑酸盐反应，替代磷酸盐或草酸盐形成焦锑酸钙，焦锑酸钙在电子显微镜下为电子致密物质。

来源：丁香实验

操作方法

钙离子细胞化学具体方法

1. 组织切成约 1 mm3 的小块，用 0.09 mol/L 磷酸钾（或草酸钾）-3％戊二醛（pH 7.3，用 0.1％～1％ KOH 调 pH）固定 4 h 以上，4℃。也有人推荐固定早期用微波照射，以加速固定液渗入细胞内部（关于微波照射使用情况参见有关章节）。2. 固定后用 0.09 mol/L磷酸钾（或草酸钾）-4％蔗糖（pH 7.3）漂洗2～4 h，换液3 次。3. 1.5％～2％