一般一次上样的蛋白总量是多少，跟目的蛋白的表达量有关系吗？

一般建议的蛋白量是49ug-60ug，在刚开始实验阶段为了拿到阳性结果，各个步骤都可以量多一点时间长一点，当然背景也就出来了。

跟目的蛋白的表达量有关系，目的蛋白表达低，总的蛋白上样量得加大

WB一般上样30-100μg不等，结果跟目的蛋白的表达峰度、上样量、一二抗的量以及孵育时间都有关系，也与显色时间长短有关。