切片出现非特异性染色可能原因？

抗体的特异性不高，或者一抗二抗以及封闭液选择的种属没有避开相同的种属，造成内源性IgG的干扰。

1如果检查过程中使用的抗体过期，或者抗体效价不够，均会导致非特异性染色。

DAB染色时间太长或者变质，在进行DAB的孵育时间扩张会造成背景非特异性染色。

存在内源性酶和生物素。

如果一次性染太多片子的时候，容易出现组织变干，会导致非特异性染色。

如果切片在缓冲液中修复液里面浸泡时间过长，会导致非特异性染色。

抗体浓度过高。

清洗不充分。针对这个问题清洗一定要充分，PBS液体一定要双蒸水新配，用之前再次测定pH值。

如果选择了不正确的封闭血清，也会导致出现非特异性染色影响检查的结果

1. 样本是否新鲜
2. 抗原修复是否合适
3. 一抗的特异性
4. H2O2封闭
5. ihc笔圈号疏水圈防止漏液
6. 清洗充分