小分子蛋白与Daylight 650 NHS酯偶联

将Daylight 650 NHS酯与一个小分子抗体偶联，分子量在15kDa，大小是单抗的十分之一，一般连完怎么确定有没有连上呢，用ELISA测定，633激发后测不到荧光，是不是没连上，用Amax/A280又大于1，求指点。