悬浮细胞测不出细胞活力

Day1：从C57BL/6小鼠提骨髓原代细胞，加IMDM（10%FBS），以106个/ml的细胞密度在恒温箱培养24h。

Day2：以不同密度在96孔板同时染毒和种板，先在EP管里染毒，再种板，培养24h

Day3：加20ul的cck8或者WTS-1，培养箱4小时测细胞活力，奇怪的是，发现对照组和溶剂对照相比都并无明显改变

一些结果

奇怪的是，对照组都无效应，贴壁细胞能达到1点几左右

又加大了细胞密度区间，也看了了镜下细胞密度，发现也不行

继续做，终于看到一点效应了，如下图

继续减点细胞密度，效应也还可以

然后跟老板讨论，说对于96孔板来说，这个密度太大了，关键是之前师姐种的2万效果很明显，但我做了快2月了还是不行，同实验的一个师姐做的外周血的淋巴细胞，也是悬浮细胞，她也跟我一样的问题，很多遍都不能做出来，后面还换了LDH指标，效应也不明显，关键我们也做了台盼蓝染色，死细胞并不多。求求有没有人遇到类似的问题可以解答一下，要被这个简单的细胞活力实验整疯了。