灵枢天问
你是用的小鼠么。换一个好一点的分离液,然后整体操作一定要快,分离液很容易挥发,小心吸取你要的细胞层,这样杂质会少很多
土井挞克树
首先,你的离心过程没有将杂志与细胞分开。
无菌分离小鼠的脾脏,放于complete medium 1640培养液中保存,然后置于 400目细胞筛上,用OT注射器内管棒将脾脏碾碎,并用Hank‘s液冲洗,4度、1500rpm、15min离心两次,弃上清液
尝试首先研磨适当,然后两次离心
每天学习新知识
谢谢你,但是我的不是没有碾碎的问题,也不是没有洗干净的问题,更不是离心的问题,整个脾脏内部都是渣渣,我用了200目的筛网,没有筛住,感觉筛网孔径太大,请问能不能用100目的筛网,或者细胞能不能用什么滤器过滤一下行不行,如果杂质太多,是不是对骨髓瘤细胞和脾细胞融合效率影响很大
汤姆卜丽波
有专用的细胞筛在分离液里筛应该会好很多
每天学习新知识
谢谢你,我用了200目的筛网,没有筛住,感觉筛网孔径太大,请问能不能用100目的筛网,或者细胞能不能用什么滤器过滤一下行不行,如果杂质太多,是不是对骨髓瘤细胞和脾细胞融合效率影响很大
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