IL-2增殖，一定要用ConA吗，不能直接加工程菌产的IL-2做实验吗

不一定

IL-2的生物活性测定需要稳定、敏感的IL-2测定细胞。

IL-2测定细胞大体可分为两大类：一类是IL-2依赖性细胞株（CTLL-2 )。其特点是只有在IL-2存在的培养条件下才能生长，否则会在24小时内死亡；另一类为新鲜制备的对IL-2有反应性的淋巴母细胞，这类细胞在IL-2存在的培养条件下生长能力增强，但无IL-2存在时并不死亡。这类细胞可替代第一类IL-2的检测。在培养过程中，加入待测溶液，如果细胞能够生长，表明待测标本中有IL-2。为了获得较好的特异性，常使用IL-2依赖性细胞株（CTLL-2)。

ConA可使T淋巴细胞转化为淋巴母细胞。淋巴母细胞为IL-2反应细胞，可表达丰富的IL-2受体，该细胞可在体外连续培养并与IL-2含量呈试剂依赖关系。它对有丝分裂素（如ConA）无反应性或反应极微。因此，在无CTLL细胞株的情况下可用该细胞做IL-2检测。

不一定，直接加工程菌产的lL－2.EdU是我们检测细胞增殖的最新技术，灵敏度、精度等都要比以前的好得多！而且操作简单、方便，没有任何毒性，可以用于几乎任何增殖、周期相关的体内试验和细胞试验！

可以直接提取T淋巴细胞，但注意细胞培养的过程；之前自己做实验存的IL-2生物活性检测的SOP可供参考:

a.CTLL-2细胞制备:取传代培养24-48小时对数生长期的CTLL-2细胞，用培养液离心洗涤2次，每次1000r/min离心5分钟，再用10%FCS-RPMI-1640培养液调整细胞浓度为undefined105/mL。

b.加样：将细胞接种于96孔培养板，每孔0.1mL。同时将待测样品和标准品做倍比稀释，每孔加入0.1mL，每个稀释浓度均设3复孔。另设培养液对照孔（100μL细胞+100μL培养液）。37度，5%CO2孵育40小时。

c.MTT掺入：轻轻吸取上清液100μL，加MTT（1mg/mL）100μL，37度，5%CO2孵育2小时。

d.测定：离心培养板，2000r/min，5分钟，吸弃上清液，每孔加100μLDMSO，作用30分钟，用酶标测定仪于波长570nm测吸光值（A）。

e.计算：用标准品浓度和对应的净A570nm值（实验孔-阴性对照孔的A570nm值）绘制标准曲线。根据标准曲线求出待测样品IL-2水平。

不一定吧、在无CTLL细胞株的情况下可用该细胞ConA做IL-2检测。