关于大鼠软骨细胞的II型胶原免疫组织化学染色问题？
医者人心011
做大鼠原代细胞的分离与鉴定，包括甲苯胺蓝染色和II型胶原的鉴定，这个II胶原的鉴定，我是爬片、4%多聚甲醛固定、0.5%TritonX-100通透、5%山羊血清封闭，一抗4度过夜，二抗暗室孵育1h，但是在荧光显微镜下看不到颜色。为什么附完一抗二抗荧光显微镜下却观测不到呢？
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3 个回答
HD8023
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免疫荧光染色出不来，有可能是一抗的问题。
Eason老歌迷
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如果免疫荧光染色出不来，首先考虑一抗选择的问题。有些一抗能做WB，却不能做IHC。也可能是多聚甲醛固定时间过长或者不够。或者是一抗(你确定你加的抗体量是足够的)使用量不够或者稀释比例过大,重新调整后再重染。
申东熙老伯
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封面的时候有用抗荧光淬灭剂封片吗？可能是玻片封完片放得久没有观察荧光淬灭。
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