如何去除RNA提取过程中的蛋白质污染

可以用氯仿抽提之后离心，离心后分三层，下层有机层中有一些脂溶性的杂质，中间层白色絮状沉淀是蛋白，上清液中即含有核酸。也有很多试剂盒，是可以把核酸挂在柱子上，把蛋白质等杂质离心掉。

你提rna的时候，保证吸最上层液体的时候，不要碰到底下的那个白色的片片就没问题。或者舍弃一部分含rna的液体，就吸400ul，一般就不会有蛋白质的污染。

1、可以加入0.25倍体积的RNA沉淀液去除RNA中的多糖和蛋白聚糖。（1.2M NaCl 0.8M 柠檬酸钠）

2、吸取上清的时候小心点，吸取少点

3、试试增加酚氯仿抽提次数。每次抽提尽量充分混匀

提组织的RNA有的时候蛋白的含量会很多，可以在加TRizol和氯仿抽提完第一次以后不加异丙醇，而直接加入TRizol氯仿再抽提一次，第二次抽提后会发现中间的蛋白明显减少的，如果感觉蛋白还是很多的话，再抽提一次也是可以的。

蛋白污染可以考虑用酚氯仿多抽提几次,记得吸上清的时候小心点,宁可浪费也别吸到界面.一般后续还需要用氯仿/异戊醇抽提来去除酚.这样基本蛋白污染就可以去干净.实在不行,抽提一次后,就用蛋白酶K消化30min,再抽提.

确保不要吸入中间层及有机相。 减少起始样品量 ， 确保裂解完 、彻底。加入氯仿后首先要充分混匀，并且离心分层的离心力和时间要足够。