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【讨论】FISH中如何去除宫颈癌中的角化蛋白以更好暴露核酸。

丁香园论坛

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FISH中如何去除宫颈癌中的角化蛋白以更好暴露核酸。

宫颈癌或肺鳞状细胞癌中有大量角化蛋白,在FISH中可以激发荧光,并且影响探针杂交,有什么好的方法去除角化蛋白?我们用水煮法效果不是太好。鳞癌中的角蛋白是和成分?
是否可以考虑用蛋白酶处理一下?
建议用蛋白酶消化,细胞涂片也可以用蛋白酶消化的。SSC老化之后用50ug/ml的蛋白酶K(Merck) 37度消化7分钟(请自己按实际情况选择浓度和时间,消化完后用DAPI复染看细胞核有没有被损伤,不要急着上探针杂交),然后用2X SSC洗两遍,梯度乙醇脱水后上探针。

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