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淋巴细胞培养既可选择培养板(24、48、96孔、培养瓶,也可选择三角烧瓶、试管等器■进行培养有研究表明提取的淋巴细胞用1. 5ml离心管培养72小时细胞生长状况良好细胞数与培养前比较,差异无统计学意义(P 20 05) .用青霉素小瓶进行培养淋巴细胞生长也非常好。可以认为,对散在的细胞培养来说用小器皿具有以下优点: (1)便于操作1.5ml离心管为次性使用,青称崇小瓶可反复刷洗,而培养板、培养瓶价格偏费且用过几次之后,便有些模期不清尤其是塑料的。更为重要的是淋巴细胞培养为悬浮培养,在培养过程中需要不断见动,而大多数实验室没有恒温感床。我们发现,在培养过程中每隔68小时晃动次培养器皿,便可解决这个问题,青霉素小题、1. 5oml离心管晃动起来相对容易些。(2) 减少污染因为淋巴细胞培养的液体量较少,般为100 200u .故文献资料中多见用培养板(48 、96孔) ,少见用培养瓶,对分散的淋巴细胞培养,方面次用不了那么多孔,另 方面一旦孔有污染,其他孔便有可能被波及,使其他孔的培养也失败。而且,晃动培养板时,很容易使液体强到培养板上,增加污染的机会,而使用青霉素小瓶、1.5ml离心管等小器皿便可避免这些现象,但缺点是不易观察细胞生长,高取样加到载收片上观察。
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1) 便于操作:1. 5ml 离心管为一次性使用,青霉素小瓶可反复刷洗,而培养板、培养瓶价格偏贵且用过几次之后,便有些模糊不清,尤其是塑料的。更为重要的是,淋巴细胞培养为悬浮培养,在培养过程中需要不断晃动,而大多数实验室没有恒温摇床。我们发现,在培养过程中每隔6~8小时晃动一次培养器皿,便可解决这个问题。青霉素小瓶、1. 5ml 离心管晃动起来相对容易些。(2) 减少污染:因为淋巴细胞培养的液体量较少,一般为100~ 200μl , 故文献资料中多见用培养板( 48 、96孔) ,少见用培养瓶。对分散的淋巴细胞培养,一方面一次用不了那么多孔,另一方面一旦一孔有污染,其他孔便有可能被波及,使其他孔的培养也失败。而且,晃动培养板时,很容易使液体溅到培养板盖上,增加污染的机会。而使用青霉素小瓶、1. 5ml 离心管等小器皿便可避免这些现象,但缺点是不易观察细胞生长,需取样加到载玻片上观察。
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看楼主的目的,一般来说淋巴细胞体外培养需要刺激,此时使用96孔板会比24、48孔合适,孔越少的培养板表面积越大越容易挥发液体
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