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请问有大佬知道混合淋巴细胞反应(单侧),用丝裂霉素处理时,其剂量用多少?

相关实验:混合淋巴细胞培养实验

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dhjcdjn

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4 个回答

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dxywode

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MTT法:
取正常健康人外周静脉血,经淋巴细胞分离液密度梯度离心,取界面细胞(PBMNC),贴壁2h后,吸取非贴壁细胞即同种异体淋巴细胞,用培养液调细胞浓度为1×106 /ml作为反应细胞(R),DC与单核细胞作为刺激细胞(S),单核细胞为对照组,经25ug/ml丝裂霉素处理,调细胞浓度为5×105、2×105、1×105、5×104/ml,96孔平底培养板中按刺激细胞:反应细胞(S:R)=1:2、1:5、1:10、1:20加入,每组三个复孔,终体积200ul。分别设立刺激细胞对照组(不同浓度刺激细胞100ul+培养液100ul)和反应细胞对照组(反应细胞100ul+培养液100ul),每组三个复孔,37℃、5%CO2 、饱和湿度培养箱中培养5天,实验终止前4h,每孔加入新鲜配制的5mg/ml的MTT20ul,离心(1000rpm,5min)去上清液,每孔加入分析纯DMSO150ul,振荡5min,于酶标仪上490nm处读取OD值,按下列公式计算刺激指数(SI)

SI=实验组OD值/反应细胞对照组OD值

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yfcwyh

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新鲜外周静脉血按1∶1比例加在装有比重为1.077的淋巴细胞分离液的离心管中,轻稳加在液面上. 2000 r/min离心20 min,吸取中间雾状淋巴细胞层. 生理盐水洗涤2次. 台盼蓝染色,计数板计数. 调整细胞密度为2×109/L,分成3管,各自离心,留取沉淀. 每管中加入250 μL丝裂霉素(终浓度50 mg/L)和1.75 mL生理盐水,37℃水浴40 min, 生理盐水离心洗涤2次. 用含100 mL/L胎牛血清的RPMI 1640液调整细胞密度为1×1010/L.加入抗体封闭抗原.标记为D。

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小布丁瑶瑶

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2mg的丝裂霉素C溶解到2.5ml的RPMI-1640培养基里面,配成800ug/ml的储存浓度,-20度保存,使用时按需要添加。

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lzy必有我师

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间歇用药法 4-6mg/日,每周静脉注射1-2次。连日用药法2mg/日,连日静脉注射。

大量间歇用药法 10-30mg/日,以1-3周以上间隔静脉注射。

与其它抗肿癌药物合用 2-4mg/日,每周1-2次。

必要时也可以2-10mg/日,注入动脉、髓腔或胸、腹腔。膀胱肿瘤 预防复发时,4-10mg qd或隔日注入膀胱;治疗时,10-40mg qd,注入膀胱。

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