ELIISA全菌包被检某个蛋白的时候，阴性对照特别高，怎么办

可能原因1：阴性对照空被阳性或样品污染

建议：洗涤时，勿将洗液溢出孔外

可能原因2：洗涤不充分

建议：确保在洗涤时每个孔都充满液体，确保将残余液体从空中移除

可能原因3：酶结合物过浓

建议：请检查酶结合物是否按照说明书规范稀释

可能原因4：孵育温度过高

建议：检查孵育箱的温度是否正确、稳定

可能原因5：底物在使用前曝光

建议：应保存在暗处、避光

可能原因6：读板前停留时间过长

建议：加终止液后3分钟内读板

ELISA的前带效应。前带效应（或后带效应）其实是由测量程序的固有属性产生。对于所有测量程序而言，都有分析测量区间（analytical measurement interval，AMI）这一个重要属性。两个思路：1. 优化测量程序，拓宽AMI，通过提高原料用量或者改进包被工艺，使目标浓度进入AMI以内；2. 建立稀释方案，通过稀释使目标浓度降至分析测量区间以内，再对其进行检测。第二种思路其实是在建立扩展测量区间（extend measurement interval, EMI），也是免疫检测试剂的一个重要属性。