于小闹0808
府宅
柱超载法,通常指在分离条件不变的基础上增大进样量。超载可提高制备效率,以柱效下降一半或容量因子k降低10%为宜。超载进样的程度取决于分离情况。超载一般分为体积超载和浓度超载。
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可以浓缩样品,也可以根据目标分子量透析掉一部分小分子蛋白。一般地,超载30%是不会有问题的。如果已经超了不少了,而且小分子量的也要,可以考虑加大胶的厚度,可以试试1.5mm的。
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按比例放大,即采用更大内径的分离柱,通过增加流速、增加柱长来增加进样量。该方法的优点是可保持样品的浓度不变,因此峰型依然符合高斯曲线,峰型尖锐,对称性好