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了解动物实验中需要用到的试剂的类型

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按照其贮存状态来分: 试剂有已配好的即用型试剂和需要配制的试剂。

前者,如:一些性质较稳定的、或单剂量包装的试剂。像Western中的DAB显色试剂就有现成的可直接用。后者,如:大多数的药物、试剂。当然,要配制的占大部分。

按其用途来分,可分为:

药物:通常就是我们要考察其药效或机制的化合物或中草药提取物。又可分为原料药和制剂。原料药一般可直接应用。制剂有的要进行提取,有的可直接用。

动物模型用试剂:如:造糖尿病的STZ、造肝损伤的氨基半乳糖胺、四氯化碳、造睾丸损伤的镉剂、造成肺损伤的博来霉素、造成肾损伤的腺嘌呤、造成炎症的角叉菜胶等等。

动物模型用饲料:这个一般是固体状态。也有半固体的。液体状态的较少。如:高脂饲料中要配以胆固醇、丙基硫氧嘧啶、胆酸盐、鸡蛋黄、猪油等。

动物基本操作用试剂:如:麻醉用试剂、动物除毛的试剂硫化钠、动物标记的试剂苦味酸、取血或插管用的试剂肝素、消毒用的75%乙醇、碘伏、新洁尔灭、动物手术后护理的抗生素等。

各类缓冲液或基础分散介质:如:PBS、生理盐水、柠檬酸缓冲液、克氏液、任氏液、配难溶性药物用的0。5%CMC-Na液、DMSO液、增溶剂泊洛沙姆(与药物混匀后再加入溶剂中)

保存标本的试剂:如:10%福尔马林、中性福尔马林、4%多聚甲醛、Bouin's液等。

清洗液:如:稀盐酸液、重铬酸钾洗液。

检测试剂:这个因实验而异。不同的实验有不同的方法。可以另开专题讨论。

按其使用时限来分:

即配即用型:如:STZ极易分解,配制后要迅速全部用完,不然完全失效。一些酶类的试剂,配制后也要尽快用完。已配好的显色剂,通常也是较短时间内用完。对水不稳定的药物,如:青霉素。尽快用完。

可在一周内使用短效型:主要是一些亚稳定状态的溶液。可随温度、氧气的作用而逐渐分解而达不到使用的要求。如:蛋白电泳中的过硫酸铵,是一种促进氧自由基产生的辅助试剂,促进凝胶的形成,时间久了就不能产生自由基,故而一般在一周内使用,最多两周。有些缓冲液,尤其是做离体实验的,一般低温保存下尽快地用完。不然可影响实验结果。

一个月以内的中效型:许多试剂在配好后,如果能低温保存,能用一个月以上。

三个月以上的长效型:不少性质稳定,且对浓度准确度要求不是太高的溶液,可长期保存使用。像福尔马林、生理盐水、CMC-Na溶液。

按其纯度可分为:

化学纯:一般化学实验用的,含少量杂质.纯度一般应在98%以上.

分析纯:做分析实验用的,含微量杂质,纯度一般应在99%以上.缩写: A.R

色谱纯:液相流动相的要求.据本人理解应是不出现杂峰.纯度可能在99.9%.

生化纯:好像在一些生化试剂里有这么写的.缩写:B.R

要注意的是,有些厂家有标明 优级纯(G.R)的, 实际上,可认为相当于分析纯的级别.

还有就是级别最高的:标准品、对照品。其实这二者差别不大。我们通常混用这两个词。按药典规定,我们通常用的基准物质称为对照品。而抗生素类(注意,不是合成抗菌药)的基准物质则称为标准品。而事实上,我们似乎总是把“标准品”当作最高级别,而把‘对照品’当作一个比“标准品”低一点的级别。事实并非如此,这两个词应是一样的。只是标准品特指抗生素或其它生物制品。

特此将二者区分如下:

对照品、标准品系指用于鉴别、检查、含量测定的基准物质。

其中, 标准品特指用于生物检定、抗生素或生化试剂中含量或效价检定的基准物质,按效价单位计,与国际标准品标定。

如:青霉素的基准物质称为标准品,而氧氟沙星的基准物质则称为对照品。但在所发表的论文中,我们所看到的绝大部分情况是二者混用。称青霉素为对照品的、标准品的,都有。

那么这些基准物质要达到什么样的要求?我想,纯度至少要达到99.99%吧。生物制品或抗生素则不一定了,因为有的抗生素实际上就是混合物的。只能用效价来评定。

在配制标准品或对照品时,尤其注意要准确。通常,我们在称量10mg以下的物质时,是很难准的。因此,我们在配某些试剂时,可考虑先称10mg以上的物质配成较大的浓度,再逐步稀释,所得浓度要准确一些。

每一种试剂对不同级别的规定和要求是不同的.

我们可以看到论文中要标明试剂的纯度。通常有写到化学纯、分析纯、色谱纯、纯度达到多少?含标示物多少?等等。这需要在做实验之前了解我们所要用的试剂的纯度要求是怎样的。不然难以得到满意的结果。如:需要用色谱纯的试剂用了分析纯,可能会得到失败的实验结果。

动物实验中,用到分析纯及以上级别的比较多。做药动学实验,液相检测时要注意,要用色谱纯试剂,不然严重影响实验结果。

按其毒性,有无毒、低毒、中等毒性、剧毒几种。

要注意毒性试剂的保存,以及实验过程中自身的防护。

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