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可以低温:4℃;低速:人血~2000rpm、小鼠~1000rpm、大鼠~2500rpm
陈文豪平邑
大小适用2ml或5ml注射器进行采集1ml或2ml全血,下静脉不能采集的选择心脏采血。3血清的分离
使用注射器采集的全血,采集后将注射器拉至最大刻度。针头向上倾斜放置、防止血液颜固堵塞注射器,保证血液与空气接触面积,负压管平放即可。气温越高,血液凝集的越快,但不能在阳光下暴晒,冬天注意保温,待血液凝固后再放人保存箱。带回实验室处理。
根据实际情况。选择室温过夜或者37℃2-3h。当血清自然析出后。将血清转移至2ml离心管中。如血清中有血凝块。可用离心机8000转/min、离心3min,进一步分离血清。按照上述方法,血清可获得1.5ml以上。鸡血清可获得1毫升左右。血清分离后、分装、留样的血清-20℃保存。有条件的可以-80℃保存,检测用的血清。如果1周内进行检测可4℃保存。-20℃保存的血清抗体效价6个月内变化不大,应避免反复冻融。4注意事项
(1)采集全血时要注意无菌操作。用酒精对采血部位进行消毒,待血液凝固后尽快送至实验室处理,防止样品污染腐败
(2)采血时要注意控制血流的速度。同时避免血液中混入酒精等导致溶血。
(3)采集后的样品在运输过程中应避免剧烈震动导致溶血。(4)使用离心机分离血清时,要控制好转速和时间,否则易导致溶血。
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大鼠血液抽取后确实容易发生溶血,取血后,注入清洁干燥玻璃试管内,并立即放入离心机2 000~2 500 r/min,离心1~2min。然后取出试管,置37℃水浴箱内4~5 min。从箱里取出试管,用玻璃小滴棒轻轻将上层纤维蛋白剥离管边。再离心沉淀2 O0O~2 500 r/min,1~2 min,即得血清标本。使用这种方法的优点:应用本法分离血清,时间短,操作简便,一般在抽血后10 min之内即可得到血清标本;由于本法分离血清,未添加任何化学试剂,故不改变血液的原有成分,对项目测定也不会产生任何干扰和影响。
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1.血清(serum)的一般制备方法可参考以下: 采集血液样本,置于不含抗凝剂的收集管内(试管或离心管),室温下静置自然凝集30~60min,待血液凝固,沿收集管壁将血凝块轻轻划开,4℃放置过夜,平衡后,低温低速离心10min,(低温:4℃;低速:人血~2000rpm、小鼠~1000rpm、大鼠~2500rpm),上清即为血清,大概1ml血液能收集300-400ul血清, 立即操作、冷藏或冷冻血清样品,血浆(plasma)的一般制备方法可参考以下:采集血液样本,置于含有适当抗凝剂的收集管内(试管或离心管),轻轻颠倒摇动收集管,以混匀血液,低温低速离心10min(血样采集后1h之内进行)上清即为血浆立即操作、冷藏或冷冻血浆样品。
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