豚鼠的取血法及血清和血浆的制备方法

 

一、豚鼠的取血法
（1）足背中静脉取血：助手固定动物，将其后肢膝关节伸直捉到实验者面前，实验者将动物脚背面用酒精消毒，找出背中足静脉后，以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端，右手拿注射器针刺入静脉。拔针后立即出血，呈半球状的隆起。采血后，用纱布或脱脂棉压迫止血。反复取血时，两后肢交替使用。
（2）心脏取血：豚鼠的心脏取血法与兔的采血方法相似。
二、血清和血浆的制备方法
血清和血浆均是不含细胞（包括血小板）等有形成分的血液液体部分，其主要区别是血清不含凝血因子和血小板，血浆则含有凝血因子，它们的制备方法如下：
（1）血清的制备：获得的血液不能抗凝，盛于离心管或可以离心的器皿中，静置或置37℃环境中促其凝固，待血液凝固后，将其平衡后离心（一般为3000rpm，离心 5～10min），得到的上清液即为血清，可小心将上清吸出（注意切勿吸出细胞成分），分装备用。
（2）血浆制备：在盛血的容器中先加人一定比例的抗凝剂（抗凝剂：血液 = 1：9，将血液加到一定量后颠倒混匀，离心（离心条件同上）后所得的上清液即为血浆。初用者最好将上清移至另一清洁容器，吸出血浆时用毛细吸管贴着液面逐渐往下吸，切忌不能吸起细胞成分。
（3）富含血小板血浆制备：将获得的血液经800rpm，离心5min，其上清即为富含血小板血浆。

常用血液抗凝剂

 

剂名	抗凝力	机理	应用	禁忌
10%草酸钾	0.2ml抗凝10ml 的血	与Ca2+ 结合成不溶性草酸钙而抗凝血	非蛋白氮二氧化碳结合力	血K+ 血Ca2+
草酸钠	1～2mg抗凝1ml的血	与Ca2+ 结合成不溶性草酸钙而抗凝血	凝血酶原时间及复钙时间测定	血K+ Ca2+
3.8%枸橼酸钠	6mg抗凝1 ml的血	与血中生成不溶性离子化的枸橼酸钙，阻止血液凝固	输血、凝血象1：9血沉1：4
双草酸盐（草酸钾、草酸胺）	0.5ml抗凝5ml的血	保持红细胞形态不变	RBC压积测定
草酸钾3g、氟化钠1g混合剂	4mg抗凝1ml的血	抑制葡萄糖分解而保持血糖浓度	血糖测定	BUN （尿素氮）
肝素	0.1ml抗凝5～10ml的血；15±2.5IU(干粉)抗凝1ml血	抑制凝血酶原转为凝血酶	血氨 血气分析	3P试验
EDTA-K2	1.5～2.2mg（干粉）抗凝1ml血	与Ca2+ 结合成不易电离的可溶性络合物	血细胞计数	凝血象，血小板功能