提取血清中microRNA及后续实验

我一般是用trizol直接提总RNA后进行miRNA反转录。  请问楼主用trizol提取血清总RNA后，测出浓度和OD值如何？我用250ul血清提取，但出来浓度值和OD值都很低，不知是否有步骤改善的地方

1. 对于血清中的microRNA的提取，专用的microRNA提取试剂盒和TRIZOL方法都是可以的。试剂盒通常更加方便，而且更容易获得高质量的RNA，尤其是对于microRNA这种较小的RNA分子。然而，TRIZOL方法也可以有效提取RNA，包括microRNA，只是可能需要更多的优化。具体选择哪种方法，取决于你的实验室条件和预算。

2. 通常情况下，对microRNA的逆转录是需要使用特定的microRNA的茎环结构下游引物的，同时你也需要一个内参基因，比如U6，来校准和控制你的实验条件。这个内参基因的引物通常是常规的下游引物。

3. 对于qPCR的试剂，普通的SYBR Green方法是可以的，尤其是在预算有限的情况下。但需要注意，SYBR Green是会与所有的双链DNA结合，所以有可能会检测到非特异性的扩增产物。探针方法如TaqMan则更为特异，因为它们设计的探针只有在目标序列存在时才会发出信号。所以选择哪种方法，又一次取决于你的实验需求和预算。

提取血清中microRNA，TRIZOL方法也可以提取。建议使用专用试剂盒提取更好。

有专门的提取试剂盒，trizol方法也可以用于提取，就是纯度和效率可能不如专门的试剂盒