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请教ELISPOT斑点模糊问题

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丁香实验

最近在做鸡IFN-γ ELISPOT实验,但是结果总和图12一样,第一排都是阳性刺激结果和第三排阴性对照一样都是模糊的色团,请问有见过这种问题的吗?图3是买的包好的板子,斑点就很明显,但是是小鼠的。

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4 个回答

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西柚味的芋圆

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我的推测是包被的抗体的问题。你这个我自己包被的时候遇到过,但是已经包被好的板子这样的话,不知道原因,是不是没洗干净呢,洗板液要用PBS不能用PBST
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txs900416

有帮助
主要考虑抗体效价是否合适,此外洗涤方式是否彻底也很重要
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dxy_0mxazdaw

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一方面有可能洗涤条件不够合适,另一方面抗体浓度可能不够。建议适当增加洗涤次数和时长,并且抗体浓度应该做一个梯度,选出能够出现清晰点的抗体浓度。
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sk1981521

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应该是种属差异性问题,你买的是小鼠的试剂盒,而检测的是鸡的
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