把CAMV35S启动子连在LUC载体前应该怎么做

首先应该设计引物（带有酶切位点和保护碱基等），pcr出来酶切连接载体

将CAMV35S启动子克隆到LUC载体中的步骤如下：

1.设计引物：设计一个CAMV35S启动子的引物对，使其扩增出CAMV35S启动子序列和LUC载体的多克隆位点序列，以便克隆。

2.扩增PCR产物：使用设计好的引物对扩增出CAMV35S启动子序列和LUC载体的多克隆位点序列。

3.双酶切：将PCR产物和LUC载体进行双酶切，选择合适的限制性内切酶，在PCR产物和LUC载体的多克隆位点上进行酶切。

4.连接：将CAMV35S启动子的PCR产物与LUC载体连接，使用DNA连接酶进行连接反应。

5.转化：将连接产物转化到适当的细菌中，例如大肠杆菌（E. coli）。

6.筛选：通过PCR或限制性酶切鉴定得到的重组质粒是否正确。

7.扩增：对正确的重组质粒进行扩增，得到足够量的DNA进行后续实验。

注意事项：

1.在连接反应时，要注意CAMV35S启动子的方向和LUC载体的方向是否正确，以确保正确的连接。

2.在扩增PCR产物和重组质粒时，要注意温度和时间的控制，避免产生不必要的突变。

3.在实验中使用的酶和细菌要确保纯度和质量良好。

可以使用启动子+GUS进行连接。