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WB泳道发黑,背景高

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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学习快乐lal

内参背景正常无发黑,但是目的蛋白出现泳道发黑的情况,背景高的情况

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3 个回答

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sswei

有帮助

没有封闭好,但这个可能很小

一抗浓度太高,适当降低增加一抗稀释比例

二抗孵育时间太长,一般室温45min,二抗切不可孵育时间太长 背景太高,抗体浓度太大的原因。

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周末也要努力呀

有帮助

考虑原因是,抗体浓度太高或者封闭时间不足

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高山云初

有帮助

一般跟一抗有关系吧,背景高有几点原因:1.过量的抗体;2.不当的洗膜条件;3.抗体过时或受损;4.蛋白质降解;5.膜过于湿润;6.检测抗体非特异性结合。

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