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wb实验中,一抗敷完,可以泡在tbst里面第二天再敷二抗吗?一抗敷完头一天需不需要洗?如果不洗,第二天需要洗吗?
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不可以,效果会不好,泡Tbst时间长了会影响显色效果,问就是试过这样,出来很淡
高山云初
不可以。wb中显完影pvdf膜放入第一抗体中,温和振荡30分钟后放入4C冰箱过夜,或着在室温下反应2小时后放入tbst中清洗30分钟,更换3到4次tbst。长时间在tbst中泡着会使wb中显完影的pvdf膜发生质变,从而导致实验失败。
毛利小五郎的徒弟
一抗孵育过夜后要冲洗的,不要孵育过长时间会影响显影效果
huarenqiang5
不可以。一抗敷完后不能泡在tbst里面第二天敷二抗,因为长时间在tbst中泡着会使wb中显完影的pvdf膜发生质变,从而导致实验失败。
小小翻车鱼
在Western Blot实验中,一抗孵育完毕后,通常需要先清洗薄膜以去除多余的一抗,然后再进行二抗孵育。在WB实验中,如果当天没有足够的时间进行二抗孵育,可以将膜在TBS或TBST中保存,但通常不建议在TBS或TBST中保存超过一天。如有需要,可以将膜放入密封袋中,放入4℃冰箱保存。但需要注意的是,在冰箱中长时间保存可能会影响蛋白质与抗体的结合效率,因此应尽量减少保存时间。第二天取出膜后,可以在室温下进行二抗孵育,以恢复活性。
小小小小小芳
可以泡在tbst里面第二天再敷二抗、一抗敷完头一天要洗的,如果由于未清洗一抗并未结合在膜上在二抗孵育清洗时也会洗掉,但是很可能会使你应该与二抗结合的一抗接触不到二抗或不均匀,造成条带不清异常,还有较强的非特异背景。
粥辰辰辰辰
wb实验中,一抗敷完,可以泡在tbst里面第二天再敷二抗、一抗敷完头一天需要洗、