JYJ1101
THP-1经PMA诱导成为贴壁的M0,再加入刺激因子后成为M1和M2,想要消化下来做流式,但是0.25%Tryspin(含EDTA)消化30min细胞纹丝不动…根本消化不下来,请问有什么好办法消化THP-1来源的巨噬细胞吗?拜托各位前辈了!
loveliufudan
消化THP-1细胞以获得单细胞悬浮液是一个具有挑战性的过程。试试下面的方法可能会有所帮助:
1. 增加消化时间:有时候,消化时间可能需要更长。您可以尝试将消化时间延长到1小时或更长时间,以确保细胞完全消化。
2. 提高消化温度:将消化温度提高到37°C可能有助于提高消化效果。请确保细胞在一个温度控制良好的环境中进行消化。
3. 试用其他消化酶:除了Trypsin-EDTA外,还有其他消化酶可以用于消化细胞,比如Collagenase或Accutase。尝试使用这些替代消化酶可能会有更好的效果。
4. 适当处理细胞:在消化之前,确保细胞处于健康状态。细胞应该在对数生长期且不过度密集。此外,细胞应该在良好的培养条件下维持,避免细胞聚集和死亡。
5. 使用细胞刮板:尝试使用细胞刮板轻轻刮取细胞以帮助细胞分散。将细胞悬浮液多次吸入和喷出细胞刮板中,有时可以帮助细胞分散并增加消化效果。
6. 考虑其他方法:如果使用传统的消化方法仍然无法消化THP-1细胞,您可以尝试其他方法,如使用细胞分离试剂盒或细胞分离柱等商业化的细胞消化和分离工具。这些方法可能会提供更高的细胞分离效率。
土井挞克树
可以在edta中加入少量胰酶消化
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