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CO ip实验中A蛋白拉B蛋白能行,但是B拉不出A是什么原因?

相关实验:免疫共沉淀(Co-IP)

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Jack123u


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3 个回答

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balalaLy

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那可能是B抗体的问题,抗原抗体结合力弱

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loveliufudan

有帮助

如果在共免疫沉淀(Co-IP)实验中,A蛋白能够拉下B蛋白,但B蛋白无法拉下A蛋白,可能有以下几种原因:

1. 结合亲和性差异:A蛋白和B蛋白之间的结合亲和性可能存在差异。A蛋白与B蛋白的结合可能比较强,使得A蛋白能够成功地拉下B蛋白。而B蛋白与A蛋白的结合可能较弱,导致无法将A蛋白一起拉下。

2. 技术问题:可能存在技术上的问题,如抗体的选择、抗体的效力或特异性,共沉淀缓冲液的配制等。确保所使用的抗体对目标蛋白具有高度特异性,并且适当优化共沉淀实验条件,例如缓冲液成分、浓度和pH等。

3. 结合构型或修饰的影响:A蛋白和B蛋白之间的结合可能受到特定的蛋白构型或修饰状态的影响。如果A蛋白在特定修饰状态下与B蛋白结合更紧密,那么在共沉淀实验中可能更容易拉下B蛋白。而B蛋白在某些条件下与A蛋白的结合可能较弱,导致无法一起沉淀。

4. 组织或细胞类型的差异:共沉淀结果可能受到不同组织或细胞类型之间蛋白相互作用的差异影响。某些细胞类型中可能存在特定的调节机制或修饰方式,可能导致A蛋白和B蛋白的结合模式在不同细胞中不同。

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灵枢天问

有帮助

说明相互作用关系是层级式的可能,A影响B但是B 不影响A

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