土井挞克树
我之前也是,诱饵蛋白拉不出来,然后用GFP一抗代替igG后就可以拉出了
loveliufudan
如果在 Co-IP 实验中,IgG 组无法拉出诱饵蛋白,但能拉出捕获蛋白,可能有以下几种可能的原因:
抗体的特异性问题:IgG 组中的抗体可能不够特异性,容易发生非特异性结合,因此无法富集诱饵蛋白。可以尝试使用更特异性的抗体或优化抗体浓度。
Co-IP 条件的优化问题:Co-IP 实验中的洗涤条件非常重要,如果洗涤条件不足以去除非特异性结合的蛋白,就可能影响诱饵蛋白的富集效率。可以尝试增加洗涤次数、延长洗涤时间、添加洗涤剂等措施进行优化。
诱饵蛋白的表达水平问题:如果诱饵蛋白的表达水平非常低,就可能无法被充分富集,可以尝试增加诱饵蛋白的表达量。
实验条件的差异:IgG 组可能存在实验条件的差异,如 pH 值、离子浓度等条件可能影响到不同的实验组结果的不同。
赛默飞世尔科技
原因可能是没洗干净,也可能是目的蛋白可以与IgG或珠子非特异性结合
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