请问26147试剂盒为什么洗不掉重链呀？频率还比较高

重链洗不掉可能是交联作用太强了，可以加用裂解液增强洗脱

26147 抗体亲和纯化试剂盒是一种可用于快速纯化含有Flag 标签的蛋白质的试剂盒。对于抗体洗不掉重链的情况，可能是以下几个原因导致的：

存在非特异性结合：如果存在非特异性结合，那么可能会导致抗体无法被完全洗脱。这可能是由于洗涤缓冲液的浓度不够高，洗涤的时间不够长，或者温度不够高等原因导致的。

存在交联：在进行蛋白质亲和纯化的过程中，如果存在过度交联，那么可能会导致抗体与其他蛋白质交联在一起，难以被完全洗脱。这可能是由于交联剂使用过多或者交联时间过长等原因导致的。

存在多余的抗体：在进行蛋白质亲和纯化的过程中，如果使用了过多的抗体，那么可能会导致抗体无法被完全洗脱。这可能是由于抗体浓度过高等原因导致的。

这和您使用的二抗有关，如果当使用常规的 Anti-IgG (H+L) 酶标二抗时，通常会出现对应免疫沉淀一抗变性后产生的重链（55kDa）和轻链（25kDa）两条带。如果检测的目的蛋白分子量在此附近时，就会受到这两条带的干扰。此外交联时要注意有关的溶液中不能有自由氨基存在