关于用只识别天然蛋白的二抗，去除轻重链。洗脱下来的IP抗体是变性的，为什么目标蛋白不是变性的？

大概率是因为环境不同，如ph，温度的差异导致ip抗体变性。

使用只识别天然蛋白的二抗去除轻重链后洗脱下来的 IP 抗体变性，而目标蛋白不变性的原因可能有以下几个方面：

抗体与目标蛋白的结构稳定性不同：抗体和目标蛋白具有不同的结构稳定性，有些抗体比目标蛋白更容易变性，而有些抗体则比目标蛋白更稳定。

洗脱缓冲液的 pH 值不同：在进行 IP 实验时，使用的洗脱缓冲液可能对抗体和目标蛋白的稳定性产生不同的影响。例如，如果洗脱缓冲液的 pH 值不适宜，可能会导致抗体变性，而目标蛋白则不受影响。

目标蛋白的稳定性：目标蛋白的结构稳定性可能比抗体更高，因此在 IP 实验的过程中，即使使用了含有去除轻重链的二抗，目标蛋白仍然能够保持其天然构象而不变性。

酸性洗脱法：0.1 M-0.15 M 甘氨酸 (pH 2.5-3) 是 IP 中最高效的非变性洗脱缓冲液，低 pH 水平可以解离大多数抗体-抗原相互作用。此方法洗脱的样品保持原有的生物活性，可用于后期功能分析。