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可以选择紫外线交联,或者化学交联法。蛋白质通过交联方法可以稳定或永久连接相互作用复合物中的成分,有助于鉴别这些瞬时接触。
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交联的方法有多种,其中常用的方法是使用交联剂。一般来说,二氧化硅(formaldehyde)是最常用的交联剂之一,可以用于固定活细胞和组织。交联时,将细胞或组织暴露在1%-2%的二氧化硅缓冲液中,将其室温孵育10-30分钟,然后用甘油或者甲醛缓冲液中和反应。交联后的样品可以用于下游实验,例如免疫共沉淀或者蛋白质质谱分析等。
另外,还可以使用光交联技术。这种技术是使用特定波长的紫外线对样品进行照射,使得蛋白质之间形成交联。这种方法需要使用特定的交联剂,并且需要对照射时间和强度进行优化,以获得最佳的交联效果。
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针对瞬时或较弱的相互作用,都可以选择交联剂进行交联。如水溶性交联剂BS3、脂溶性交联剂DSS或DSP等。
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