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我想请问coip蛋白破碎离心后,浮在上层的白色物质会不会影响蛋白与珠子结合,有什么办法可以避免吸到白色物质吗?

相关实验:免疫共沉淀(Co-IP)

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实验室小助理夏奇

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3 个回答

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土井挞克树

有帮助

可以用吸管缓慢多次吸取掉白色物质,或者加pbs稀释,更容易清除一些

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loveliufudan

有帮助

浮在上层的白色物质可能是脂质体、细胞膜等碎片,如果这些物质与珠子结合,可能会影响共沉淀结果的准确性。为了避免吸到白色物质,可以尝试以下措施:

在离心后,将上层液体小心地吸取,尽量避免吸取沉淀和白色物质。可以使用移液器或者一根长管子,从液体表面慢慢吸取,而不是直接放管子底部吸取。

将上层液体过滤或者沉淀去除白色物质,再进行共沉淀。可以使用 0.45 微米或 0.2 微米的滤膜过滤液体,或者进行一次低速离心去除大的碎片沉淀。

将样品经过多次洗涤,以去除未结合的蛋白质和碎片。可以使用缓冲液或洗涤液多次洗涤珠子,以确保去除所有的未结合物。

如果白色物质非常明显且无法避免,可以考虑使用更高品质的珠子和其他试剂,以提高结合的特异性和准确性。

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赛默飞世尔科技

有帮助

这种情况一般是细胞裂解不完全造成的,可适当优化裂解液用量和裂解时间进行改善。一般来说,如果细胞裂解后变得澄清不粘稠,这个时候再离心,该情况就会得到改善。

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