双荧光素酶插入启动子之后荧光比空载低

1. 空载荧光强，可以排除载体的原因
2. 启动子的截断片段做过测序吗，需要排除此原因
3. 此外，转染实验质粒和空载的条件也许确保一致

出现该情况，可能是在报告基因质粒构建上出问题，或是荧光素没有避光保存，或长时间暴露在室温下失效。

实验组插入基因后，载体变长了，荧光素酶基因表达较空载更低了，所以荧光变弱应该是正常的吧。

1. 启动子活性低a.优化细胞的培养条件，提高荧光素酶的表达量；b.更换强启动子（如SV40、CMV）。

有可能启动子和空载序列存在重叠，所以检测的比空载低