双荧光素酶插入启动子之后荧光比空载低
dxy_t09f9p58
如题，各位大佬走路路过看一看。我做了启动子截短，将截短体分别插入同样的空载里，做双荧光素酶实验。结果实验组的值都比空载低。这是为什么呀?已经做了好几次了，救救孩子吧
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5 个回答
是TTT
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- 空载荧光强，可以排除载体的原因
- 启动子的截断片段做过测序吗，需要排除此原因
- 此外，转染实验质粒和空载的条件也许确保一致
来一起探讨
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出现该情况，可能是在报告基因质粒构建上出问题，或是荧光素没有避光保存，或长时间暴露在室温下失效。
dxy_mqg1dtg8
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实验组插入基因后，载体变长了，荧光素酶基因表达较空载更低了，所以荧光变弱应该是正常的吧。
此用户已注销
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1. 启动子活性低a.优化细胞的培养条件，提高荧光素酶的表达量；b.更换强启动子（如SV40、CMV）。
毛利小五郎的徒弟
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有可能启动子和空载序列存在重叠，所以检测的比空载低
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