z流沙z
puro浓度还是需要再稍微摸索一下,跟细胞状态有关。MOI也需要摸索一下,取决于病毒包装的效果
loveliufudan
关于 NIH3T3 细胞的慢病毒感染,嘌呤浓度和 MOI 的选择可能因具体实验条件而异,但是一些常规的注意事项可以参考:
选取适当的病毒载体和转染试剂。一些常用的病毒载体包括 pLenti、pLVX 等,而一些常用的转染试剂包括 Lipofectamine 2000、PolyJet 等。
确定适当的 MOI。 MOI 是指病毒与细胞的接触比,常规建议使用 MOI 为 10-20。
确定适当的抗生素浓度。常用的抗生素如 puromycin 可以用于筛选感染细胞,嘌呤浓度通常在 1-2 μg/mL。
选择合适的时间点进行检测。 NIH3T3 细胞的繁殖周期约为 24-36 小时,通常建议在感染后 2-3 天进行检测,检测时可以采用 Western blot、荧光显微镜等技术。
土井挞克树
嘌呤浓度2ug/ml、moi20就可以,注意一下筛选的温度。
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