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ELISA实验中二抗用Fab还是Fc片段,如何选择?

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哎呀哎呦薇


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4 个回答

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huarenqiang5

有帮助

Fab段包含完整的可变区,以及恒定区的CH1区域。

Fc段仅指Ig恒定区CH2和CH3的区域,相当于Y字结构下面那一部分。

建议二抗用Fc片段,减少降解片段的干扰。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

都可以,我一般会选择Fc片段,特异性结合好一些

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loveliufudan

有帮助

在ELISA实验中,选择使用二抗的Fab片段或Fc片段可以根据具体实验目的和所使用的一抗种类来决定。

对于使用多种一抗的实验,推荐使用Fc片段的二抗,因为Fc片段可以与一抗的Fc区结合,从而检测多种一抗的结合情况。此外,Fc片段还可以通过与Fc受体结合来激活免疫细胞,从而增强免疫反应。

而对于只使用单种一抗的实验,使用Fab片段的二抗可以提高检测的特异性。因为Fab片段仅与一抗的抗原结合部分结合,而不与Fc区结合,因此可以减少非特异性的信号。

需要注意的是,在选择二抗的Fab片段或Fc片段时,还需要考虑实验室所使用的检测系统、实验设计以及预期结果等因素,以确定最合适的二抗类型。

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sswei

有帮助

在一些如胸腺、脾脏、血液的组织以及造血细胞、淋巴细胞、B细胞等细胞内,通常含有较多的Fc受体,这时候选择二抗时最好选择Anti-IgG, F(ab’)2 fragment这样的特异性二抗,这样就消除了由于Fc部分与IgG的非特异性结合。常规的Anti-IgG (H+L)二抗与IgG的重链和轻链都有结合反应,即与IgG的Fc的F(ab’)2片段都能结合;由于IgG、IgM、IgA都有保守的轻链结构域,因此Anti-IgG (H+L)与它们都有交叉反应。而Anti-IgG, F(ab’)2 fragment经过了IgG Fc片段的吸附,因此只与IgG的F(ab’)2片段结合。

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