土井挞克树
wb实验中用一抗,单抗好些还是用二抗及多抗好些?用于Western blot的抗体和用于ELISA的抗体有什么不同的要求?
sswei
一般来说用于 western 的抗体主要识别氨基酸序列特异性;而可用于 ELISA 的抗体则要看抗原种类,有些是识别氨基酸序列特异性,有些是识别构像特异性。所以一般根据抗体说明书来确定。
做免疫印迹时选择抗体主要应考虑两个问题,一是所选抗体是否能识别凝胶电泳后转印至膜上的变性蛋白,另一个是所选抗体是否会引起交叉反应条带。
loveliufudan
对于Western blot实验,一抗和二抗都可以使用。一抗是针对目标蛋白的特异性抗体,一般来自小鼠、兔子、大鼠等动物的血清,用于检测目标蛋白的存在与否。二抗是针对一抗的抗体,通常来自小鼠、兔子、羊等动物的血清,用于将一抗与检测物结合并放大信号。
使用单克隆抗体比多克隆抗体更有特异性,但也更昂贵。因此,对于初步实验,可以使用多克隆抗体;对于重要实验,建议使用单克隆抗体。
对于ELISA实验,使用的抗体通常是多克隆抗体,因为ELISA实验需要检测低浓度的目标物质。此外,用于ELISA的抗体通常要求在交叉反应性、稳定性、灵敏度和特异性等方面都要有很高的质量要求,因为ELISA实验通常需要非常准确的定量测量。
总的来说,选择何种抗体取决于实验的具体要求和目的。在选择抗体时,需要考虑抗体的特异性、稳定性、交叉反应性、灵敏度等方面的因素,并对实验进行严格的控制和数据分析,以获得准确和可重复的实验结果。
huarenqiang5
一般来说用于western的抗体识别的是氨基酸序列特异性;而用于ELISA的抗体则要看抗原种类,有些是识别氨基酸序列特异性,有些是识别构像特异性。所以一般根据抗体说明书来确定。