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这个是什么原因啊?是转膜温度太高了吗?但是并不是特别热啊 只是稍微热一点点🤏

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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双核论文我可以的


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6 个回答

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秋秋欣欣

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也可能是蛋白的问题,有点弥散。

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sswei

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原因一个是可能需要优化用的膜的参数和转膜的电泳条件(恒压还是恒流,电泳时间,Western转膜液含量)。一个是温度问题(是否保持低温)。

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huarenqiang5

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你这个主要考虑以下几点:

1.是否转膜电压过高;转膜中是否有气泡残留;转膜缓冲液组分问题。 解决办法:降低转膜电压,重新配制缓冲液,在电转之前小心的移除膜和胶之间的气泡

2.可能孵育时振荡不均匀,抗体和封闭液不结合。 解决办法:离心,分离二抗中的聚合体,确保孵育过程中膜完全浸没在抗体中;孵育时确保震荡均匀,尝试更换封闭液分离胶聚合不均匀,导致蛋白电泳不一致:调整聚合条件,分离胶溶液混匀后再进行聚合。

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毛利小五郎的徒弟

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抗体特异性差,抗体孵化的时间太长了

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loveliufudan

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如果转膜温度不是太高,那么这种情况有可能是以下几种原因导致的:

蛋白质电泳不够彻底:在电泳时需要确保电泳时间足够长,以确保蛋白质能够彻底分离。

过度转移或不足转移:如果转膜时间太长或电流电压过高,可能会导致蛋白质过度转移到膜上,从而使条带模糊不清。相反,如果转膜时间太短或电流电压过低,则会导致蛋白质无法完全转移到膜上。

蛋白质浓度过高或过低:如果蛋白质浓度过高,则会导致条带变宽或出现多个带,从而使结果不清晰。相反,如果蛋白质浓度过低,则会导致条带弱或者看不到。

组织或细胞的不均匀性:如果细胞或组织的数量和蛋白质含量不同,可能会导致条带宽度不一致或者出现多个带,从而影响结果的准确性。

蛋白质电泳缓冲液pH值不正确:蛋白质电泳缓冲液的pH值对电泳的结果有很大影响。如果pH值不正确,可能会导致条带模糊或者不清晰。

如果您排除了以上原因,您可以尝试调整Western Blotting的实验条件,比如调整电泳缓冲液的pH值、转膜时间、电流电压、蛋白质浓度等。如果问题仍然存在,您可以考虑尝试其他实验方法来验证您的结果。

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NatureBios

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这个结果可以将三明治结构做的紧实一些,

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