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这是因为在热蛋白组学实验中,使用表面活性剂(如Triton X-100)会破坏细胞膜,导致蛋白质的热稳定性发生改变,进而影响实验结果的准确性。此外,表面活性剂还可能影响到蛋白质与小分子药物的相互作用。
相比之下,冻融法可以在不破坏细胞膜的情况下释放细胞内的蛋白质,并且有助于保持蛋白质的天然构象。因此,冻融法在热蛋白组学TPP/CETSA方法中被广泛采用。
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冻融法主要采用反复冷冻与融化时由于细胞中形成了冰晶及剩余液体中盐浓度的增高可以使细胞破裂。
毛利小五郎的徒弟
因为冻融法的成功率高,表面活性剂容易失败。