pspcas9质粒能代替plko1用三质粒系统包装慢病毒吗？

pspcas9质粒代替plko1用三质粒系统包装慢病毒的效果较差。

不建议pspcas9质粒代替plko1用三质粒系统包装慢病毒。

慢病毒包装实验建议：

1.提高慢病毒的转染效率可以从以下三个方面：通过超速离心、PEG浓缩方法收取原液慢病毒滴度会提高；加辅助转染的试剂，如polybrene等；摸索最适合细胞的MOI。MOI（Multiplicity of Infection，感染复数）是指病毒感染细胞的比例。选择合适的MOI值，病毒的感染效率以及目的蛋白的表达量越高。

2.通过大抽质粒，去内毒素获得高质量的质粒。

3.包装细胞：一般建议选择细胞状态好的293T或293FT。

在使用三质粒系统包装慢病毒时，可以选择不同的载体来搭载Cas9和其他所需的基因元件。如果你想使用pspCas9质粒代替PLKO.1载体来搭载Cas9基因，需要注意以下几点：

确保pspCas9质粒能够在你所研究的细胞系中高效表达Cas9蛋白。pspCas9质粒不同于PLKO.1载体，需要使用其他启动子或转录因子来驱动Cas9的表达。因此，在选择载体时需要考虑到它是否能够在目标细胞系中高效表达Cas9蛋白。

确保pspCas9质粒与其他两个质粒能够顺利地共同工作。在三质粒系统中，除了Cas9质粒外，还需要使用另外两个质粒：一个负责表达包装病毒所需的衣壳蛋白，另一个负责表达转导载体。因此，需要确保这三个质粒能够协同工作，从而实现高效的病毒包装和转染。

需要进行实验验证。由于不同的细胞系对于基因编辑技术的应答可能会有所不同，因此需要进行实验验证，以确保使用pspCas9质粒能够实现预期的基因编辑效果。此外，在进行实验时，需要同时设置负对照组和阳性对照组，以确保结果的准确性和可靠性。

总之，使用pspCas9质粒代替PLKO.1载体来搭载Cas9基因需要经过仔细的考虑和实验验证。

可以代替转导，完全包装的话成功率不高。