慢病毒感染THP-1后，细胞贴壁严重

Mocking_bird

2022-06-14

用慢病毒的方法做knockdown，先在10cm皿的293T中转染PLKO.1-shRNA，PSPAX2，PMD2G（6ug，6ug，3ug），12小时后换液，加入19mlDMEM培养基，48小时后收病毒。感染thp-1细胞时，病毒液和1640培养基1：1加入（各8ml），加polybrene 8ug/ml促进感染。10小时后发现thp-1细胞贴壁了，大概有一半贴壁，可能是什么原因？

3 个回答

邢晓华I45H

2022-06-15

有帮助

细胞贴壁原因：与电荷有关，37℃时在2min内细胞之间即可形成键，该键可对0.01%胰蛋白酶起作用且仅发现于细胞之间，而细胞与底物之间则无；8min后才有稳定的键形成，也就是形成细胞贴壁现象。

汤姆卜丽波

2022-06-15

有帮助

是不是细胞密度不太够了，THP-1要密度高些才好养，转染试剂对它造成了一定伤害，再等两天，看会不会长起来，不会就要换了，换个进口培养基

秋秋欣欣

2022-06-15

有帮助

贴壁的话应该是细胞发生了分化，诱导成了巨噬细胞