我应该加大上样量还是应该加大抗体稀释浓度呢

建议加大上样量，加大抗体稀释浓度可能假阳性

非特异性条带很多可能是因为：

第一根条带使用的抗体不够纯，导致非特异性结合。

抗体稀释浓度过高，从而增加了非特异性结合。

蛋白沉淀不足或不均匀，导致条带不清晰。

蛋白过氧化，导致抗体结合困难。

对于第二根条带特别不明显的情况，可以尝试增加抗体的稀释浓度，或者使用其他的抗体进行验证。此外，也可以考虑优化蛋白的沉淀条件。

非特异性条带大概率还是抗体浓度高了，可以加大上样量，降低抗体浓度。