流星kk
用coip验证两个蛋白相互结合,用A蛋白拉B蛋白已经成功做出结果,再用B蛋白拉A蛋白的时候,input条带正确显示转染成功,但是coIP组用A抗体检测:单转A组和A+B共转组都有条带(已排除重轻链影响)可能原因有哪些呢
loveliufudan
可能是由于以下几种原因:
1.A 蛋白和 B 蛋白之间存在多种相互作用方式,如直接相互作用、间接相互作用或通过第三方蛋白质进行相互作用。
2.A 蛋白和 B 蛋白之间存在非特异性相互作用。
3.在 A 蛋白和 B 蛋白之间存在负调控关系。
4.A蛋白自身有多余的结合位点,导致自结合的情况
5.在实验中,Co-IP的抗体杂质或者不纯的可能导致结果不准确。
6.实验流程中可能有误差,如抗体结合不足,结合过多等。
这些原因可能导致实验结果不准确,可以通过进一步的实验或者其他方法来验证和证明蛋白之间的相互作用关系。
huarenqiang5
可能是两个互作蛋白的亲和力较弱导致。
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