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在实验室有的师姐她们做BCA测浓度的时候直接省掉了做标曲这一步,计算一下就得到了补的差量,但是标曲的制作是怎么来的呢?
清澈的微风
准确吸取20μl样品溶液于酶标孔中,加入BCA试剂200μl,轻摇,于37℃保温30-60min,冷却至室温后,以空白为对照,在酶标仪上562nm处比色,以牛血清白蛋白含量为横坐标,以吸光值为纵坐标,绘制标准曲线。以标准曲线空白为对照,根据样品的吸光值从标准曲线上查出样品的蛋白质含量。
土井挞克树
标曲是你拿标准浓度做的实验绘制的曲线,把每一标准分组的数据代入曲线绘制,具有稳定的参考意义。
李亚彪111
有标准品,检测标准品对应的吸光度,再曲线拟合,得出来的曲线就是标准曲线
蜡笔小迟
把标曲的各个浓度点和od值插入Excel散点图,点住某一个散点,右键,插入趋势线,点住趋势线右键设置趋势线格式,点击右侧r值和公式。非常简单。
bamboopiggy
这个BCA kit的说明书上都有,怎么作标曲,其实说白了就是蛋白浓度和OD读值之间的一个y=ax+b,做出来的直线,然后根据测的的蛋白的od值,去曲线上找蛋白浓度。你师兄师姐不做,估计是已经有个比较好用的y=ax+b了,所以他们直接计算。
你好几和户
用梯度浓度的标准品测出的吸光度做出的曲线就是标准曲线。这个曲线的方程可能是y=ax+b, 或y=ax^2+bx+c,也可能是更复杂的方程,其中y是浓度,x是OD值。你做样本,用酶标仪得到OD值(x),然后根据标准曲线方程,就能计算出浓度(y)。
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