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BCA法测定蛋白质浓度

实验分类:

蛋白质实验

最新修订时间:

简介

测定样品中蛋白浓度

原理

BCA(bicinchonininc acid)与二价铜离子的硫酸铜等其他试剂组成的试剂,混合一起即成为苹果绿,即BCA工作试剂。在碱性条件下,BCA与蛋白质结合时,蛋白质将Cu2+还原为Cu+,一个Cu+螯合二个BCA分子 ,工作试剂由原来的苹果绿形成紫色复合物,最大光吸收强度与蛋白质浓度成正比。

应用

生物科研

来源:丁香实验

操作方法

🔥 BCA 蛋白定量

蛋白标准品的准备配制 25mg/ml 的蛋白标准溶液:30mg BSA 于 1.2ml 蛋白标准配制液,-20℃ 保存。配制 1ml 0.5mg/ml 蛋白标准溶液,-20℃ 保存。25mg/ml 蛋白标准溶液PBS20ul980ulBCA工作液的配制BCA试剂(A:B)=50:1,混匀,室温 24h 稳定。标准曲线绘制(20ul 体系)0.5mg/mlBCA(ul)01248121620PBS2

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