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请问中药冻干粉给细胞浓度具体怎么给?

相关实验:BCA法测定蛋白质浓度

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那小子真衰

在做细胞的实验,把方剂做成冻干粉给细胞,给药浓度请问是怎么算的?是用不同的浓度去试验有什么浓度计算方法了?

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5 个回答

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此用户已注销

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正常是按照有效成分算,你这个应该就是提取的冻干粉的量来算。

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loveliufudan

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在使用冻干粉末的药物进行细胞实验给药时,确定给药浓度的方法可以参考以下几点:


1. 查看药物说明书,确定其有效浓度范围。初步选择一个较低浓度,例如药物有效浓度1/10作为起始浓度。


2. 按照冻干粉末的重量比例复溶成所需浓度的储备液。例如10mg粉末溶解至10mL,则浓度为1mg/mL。


3. 根据细胞培养皿/板的表面积,加上培养基的体积,计算加入不同体积储备液可以得到的终浓度。


4. 设计不同浓度梯度组,如1/10有效浓度、1/5有效浓度、1/2有效浓度、1倍有效浓度等,每组做2-3复孔。


5. 观察不同浓度组细胞的生长情况,选取细胞相对正常生长的最大浓度作为给药浓度。


6. 也可以设计细胞活力实验,确定药物对细胞半数致死浓度(IC50),其1/2-1/10作为给药浓度。


7. 确定给药浓度后,根据上述算式反推加入体积。每个批次药物用前浓度要重新确定。

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小小翻车鱼

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在进行细胞实验时,计算冻干粉药物的给药浓度需要考虑冻干过程中的损失以及药物在细胞培养液中的溶解度,以下是一种常用的计算方法:


1. 确定药物的初始浓度:首先,您需要知道冻干前药物的初始浓度(通常以质量浓度表示,mg/mL或µg/µL)。


2. 计算冻干损失:冻干过程中,药物会经历脱水和再水合过程。这个过程可能导致药物损失。为了估算冻干损失,您可以查阅药物说明书或相关文献,或者进行预实验来确定损失比例。


3. 计算药物溶解度:将药物溶解在细胞培养液中,测量其在一定体积培养液中的质量或质量浓度。根据这个数据可以计算出药物在培养液中的溶解度(mg/mL或µg/µL)。


4. 计算给药浓度:根据初始浓度、冻干损失和溶解度,可以计算出药物的给药浓度。公式如下:


给药浓度 (mg/mL 或 µg/µL) = (初始浓度 × (1 - 冻干损失比例)) × 溶解度


5. 优化浓度范围:为了确定最佳的给药浓度,您需要设置一个浓度梯度,例如从低浓度(如0.1 µg/µL)到高浓度(如100 µg/µL)。在每个浓度下处理细胞,观察药物对细胞生长的影响或目标分子的表达。


6. 确定最佳浓度:通过观察实验结果,确定最佳的给药浓度。通常,最佳的给药浓度应在产生显著生物学效应的同时,避免对细胞产生毒性。


以上方法仅适用于细胞实验中冻干药物的给药浓度计算。实际操作时,请根据药物的特性和实验条件进行调整。

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此用户已注销

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冻干粉溶解后的浓度算,冻干过程有损失

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粥辰辰辰辰

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按冻干粉的量算,进行CCK8梯度筛选

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